探讨在高原体外培养动物心肌细胞的可行性及其生长特性
探讨在高原体外培养动物心肌细胞的可行性及
其生长特性
来源：学术堂 作者：韩老师
发布于：2014-07-25 共2475 字
体外动物细胞培养已广泛应用于现代医学、生物学和分子遗传学等多个领域，是从事细胞水平
及分子水平研究所采用的基本方法。在高原环境下心肌细胞的体外培养尚未见报道。本文拟通
过心肌细胞系的体外培养，观察其生长和增殖状况，并通过绘制生长曲线，初步探讨在高原体
外培养动物心肌细胞的可行性和细胞的生长特性，为高原病研究提供实验基础。
1 材料方法
1.1 研究对象
心肌细胞系 H9C2(吉林大学一院转化研究院惠赠)。
1.2 主要仪器及试剂
-80℃低温冰箱（Thermo），台式离心机(德国)；CO2 培养箱(Thermo)、恒温水浴箱（上海），
倒置相差显微镜（OLYMPUS）；高糖 DMEM 培养基、台盼蓝(Gibco)、CCK8(碧云天）。
1.3 细胞复苏
从-80℃冰箱内取出冻存管，立即放入 37℃水浴中，快速摇晃，直至冻存液完全融化；无菌条
件下将细胞悬液移入 10ml 离心管，缓慢加入无血清培养基至 10ml，离心（1000r/
min，5min），弃上清，重复 1次；血清体积分数为 0.15 的高糖 DMEM 培养基混沉淀细胞，制
成细胞悬液，调整细胞浓度 1×108 后接种于 33mm 塑料培养皿内，放置于 59%CO237℃培养箱
中培养。
1.4 心肌细胞成活率计算
细胞培养 24h 后制备单细胞悬液；采用台盼蓝染色法对活细胞计数。细胞悬液与 0.4%台盼蓝溶
液以 9:1 混合混匀；在三分钟内，分别计数活细胞和死细胞；活细胞率（%）=活细胞总数/
（活细胞总数+死细胞总数）×100%。
1.5 心肌细胞形态学观察
采用倒置相差显微镜观察培养细胞形态,了解心肌细胞系生长及增殖情况。细胞接种 24h 内，每
8h 观察培养细胞 1次，以后为每天早晚各观察培养细胞 1次。
1.6 细胞计数和生长曲线法检测细胞增殖
细胞接种当天计为 0d，在培养的 1-15d 间每天下午 16 点取 3块平皿的细胞用血球计数板进行细
胞计数。
摘要：
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探讨在高原体外培养动物心肌细胞的可行性及其生长特性来源：学术堂作者：韩老师发布于：2014-07-25共2475字体外动物细胞培养已广泛应用于现代医学、生物学和分子遗传学等多个领域，是从事细胞水平及分子水平研究所采用的基本方法。在高原环境下心肌细胞的体外培养尚未见报道。本文拟通过心肌细胞系的体外培养，观察其生长和增殖状况，并通过绘制生长曲线，初步探讨在高原体外培养动物心肌细胞的可行性和细胞的生长特性，为高原病研究提供实验基础。1材料方法1.1研究对象心肌细胞系H9C2(吉林大学一院转化研究院惠赠)。1.2主要仪器及试剂-80℃低温冰箱（Thermo），台式离心机(德国)；CO2培养箱(Ther...
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