无血清培养基在CHO细胞培养中的应用进展
无血清培养基在 CHO 细胞培养中的应用进展
来源:学术堂 作者:周老师
发布于:2015-11-26 共3138 字
随着生物技术的飞速发展,单克隆抗体、细胞因子、疫苗和各种生物活性蛋白等生物制品在诊
断和治疗中应用日益广泛,其需求量大大增加,因此,通过体外大规模培养动物细胞生产生物
制品技术的研究越来越受到青睐。 CHO 细胞是生产蛋白类生物制品最重要的表达系统,采用
无血清培养 CHO 细胞相比含血清培养,能避免对实验动物的伤害、潜在的污染源影响、不同
批次血清间的生物活性和因子的不一致及价格高等诸多弊端,因而受到生物制药领域的广泛关
注。
1 CHO 细胞
CHO 细胞即中国仓鼠卵巢 细胞 (Chinese Hamster Ovary Cell),是最具代表性的动物细胞表
达系统,被广泛应用于生物制药领域。 它建株于 1957 年,由美国科罗拉多大学 Theodore T.
Puck 从一成年雌性中国仓鼠卵巢中分离得到,是一种连续细胞系,能传百代以上,具有永生
性。 后来陆续又有很多科学家用药物加压、极端条件筛选和诱导突变等方法筛选得到了一系列
不同表型的 CHO 细胞株[1], 如DUKX-B11、DG-44 和CHO-K1 等。
CHO 细胞能用于表达各种复杂的重组蛋白。 据统计,70%以上的动物细胞表达药物产品都是
以CHO 细胞为表达宿主[2]. 2011 年6 月批准的 27 种单克隆抗体中,其中 13 种就是通过 CHO
细胞表达的,占了约 50%的比例。
CHO 细胞之所以成为最受欢迎的宿主细胞, 主要在于其易于培养以及基因操作,而且相比其
他表达系统,它还具有许多优点[3-4]:①具有准确的转录后修饰功能,表达的糖基化药物蛋白
在分子结构、理化特性和生物学功能方面最接近于天然蛋白分子;②具有产物胞外分泌功能,
便于下游产物分离纯化;③具有外源重组基因的高效扩增和表达能力;④既可贴壁生长也可以
进行悬浮培养,且有较高的耐受剪切力和渗透压能力,外源蛋白表达水平较高;⑤CHO 细胞
属于成纤维细胞,很少分泌自身的内源蛋白,利于外源蛋白的后分离。
2 无血清培养基
无血清培养基是继天然培养基、 合成培养基之后的第三类培养基。 与传统的培养基相比,无
血清培养基不含动物血清或其他动物提取成分,但仍可满足细胞在体外较长时间生长、繁殖的
一种培养基。无血清培养基由基础培养基和添加组分两部分组成。基础培养基含有各种营养物
质,能维持组织或细胞的生长、发育、遗传、繁殖等一系列生命活动。 目前应用最广泛的是
MEM、DMEM、RPMI1640 等。 添加组分为各种代替血清的因子总称,主要包括促贴壁物
质、生长因子与激素、酶抑制剂、结合蛋白以及微量元素等几大类。 这些因子既能满足细胞的
培养要求,又能有效避免因使用血清带来的诸多不利因素[5-6].
3 无血清培养 CHO 细胞的研究进展
随着生物制品的需求加大以及无血清培养基诸多优势,越来越多的生物制药公司开始采用无血
清培养基培养 CHO 细胞, 研制适合于CHO 细胞生长和产物表达的低成本无血清培养基是生
物制药领域关注的热点。
摘要:
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无血清培养基在CHO细胞培养中的应用进展来源:学术堂作者:周老师发布于:2015-11-26共3138字随着生物技术的飞速发展,单克隆抗体、细胞因子、疫苗和各种生物活性蛋白等生物制品在诊断和治疗中应用日益广泛,其需求量大大增加,因此,通过体外大规模培养动物细胞生产生物制品技术的研究越来越受到青睐。CHO细胞是生产蛋白类生物制品最重要的表达系统,采用无血清培养CHO细胞相比含血清培养,能避免对实验动物的伤害、潜在的污染源影响、不同批次血清间的生物活性和因子的不一致及价格高等诸多弊端,因而受到生物制药领域的广泛关注。 1 CHO细胞CHO细胞即中国仓鼠卵巢细胞(ChineseHamsterOva...
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