X线照射后的EPM与唾液酸含量的探讨
X线照射后的 EPM 与唾液酸含量的探讨
来源:学术堂 作者:刘老师
发布于:2014-05-24 共1770 字
我们已报导了培养的哺乳动物细胞及其核在 X线照射后电泳移动度(EPM)降低. EPM 随着时间
而降低,以照后 4小时降低最为明显.小剂量照射,在照后保温 24 小时,有些细胞的 EPM 即恢复到
正常.EPM 的改变能完全被低浓度的疏基阻断剂、植物血凝素或刀豆素 A所阻断.
本研究应用红细胞及其残骸,因其有以下优点:(1)红细胞缺核,残骸既缺核又缺细胞浆,这样可以研
究细胞浆和细胞核两个主要成份在辐射导致的 EPM 改变中的意义;(2)培养的哺乳动物细胞的
EPM 主要决定于唾液酸、硫酸软骨索和透明质酸,而在红细胞,唾液酸是仅有的带负电荷的主要
威分;(3)红细胞易于大量得到.
材料和方法.
红细胞是在实验前由穿刺大鼠心脏取得.红细胞残骸的制备是先将红郭胞在 3℃低渗的巴比妥缓
冲液中搅拌,溶解的红细胞用低渗巴比妥缓冲液清洗三次,然后悬浮在等渗的 PBS 中以恢复膜形.
体外照射红细胞及其残骸,观察 100、250、5D0 或3...伦照射后不同时间红细胞及其残骸的
EPM.
单个细胞的 EPM 测定是用蔡氏细胞电泳装置(ZeissCytopherometer).电泳移动度按以下公式计算.
结果.
一、X线照射后 EPM 随时间的改变.
完整红细胞照后 EPM 随时间进行性地降低,以照后 4小时为最明显,到照后 24 小时恢复,但恢复
的程度与照射剂量有关.小剂量照射恢复较好,3000 沦照射未.见恢复.
红细胞残骸如同红细胞一样,照后 4小时 EPM 降低,但以后不论照射剂量多大皆不恢复.结果说
明,不论有无核或细胞浆,辐射都可使 EPM 降低,而恢复则必需有细胞浆.非照射的红细胞在 PBS
中孵育 24 小时 EPM 可降低 10%,而250 或500 伦照射的红细胞在 PBS 中观察不到 EPM 的恢复.
二、唾液酸含量.
用神经胺酶与红细胞孵育以除去唾液酸,使红细胞 EPM 降低 60%.用透明质酸酶或软骨素酶处理
对EPM 则无影响.在照后 4小时 EPM 降低最明显时测定红细胞残骸唾液酸含量,不论照射剂量
多少,唾液酸含量都没有改变,说明唾液酸含量与 EPM 降低无关.
三、温度对 EPM 改变的影响.
红细胞在 3OCPBS 中照射 500 伦,照后在不同的温度条件下孵育 4小时.EPM 降低程度在
22、3T'C 范围内与温度的变化无关,在IOOC 以下孵育 EPM 不发生改变.'
摘要:
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X线照射后的EPM与唾液酸含量的探讨来源:学术堂作者:刘老师发布于:2014-05-24共1770字我们已报导了培养的哺乳动物细胞及其核在X线照射后电泳移动度(EPM)降低.EPM随着时间而降低,以照后4小时降低最为明显.小剂量照射,在照后保温24小时,有些细胞的EPM即恢复到正常.EPM的改变能完全被低浓度的疏基阻断剂、植物血凝素或刀豆素A所阻断.本研究应用红细胞及其残骸,因其有以下优点:(1)红细胞缺核,残骸既缺核又缺细胞浆,这样可以研究细胞浆和细胞核两个主要成份在辐射导致的EPM改变中的意义;(2)培养的哺乳动物细胞的EPM主要决定于唾液酸、硫酸软骨索和透明质酸,而在红细胞,唾液酸是仅有...
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