生物信息学下SXT R391元件核心基因的进化特性探析

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生物信息学下 SXT/R391 元件核心基因的进化
特性探析
 摘要:目的:SXT/R391 元件是革兰阴性菌中研究最充分、已知成员最多的整合性接合元件
家族,本研究的主要目的是探讨 SXT/R391 元件核心基因组的适应性进化规律。方法:收集数
据库中及文献报道的 SXT/R391 家族元件数据,并利用已测序的细菌基因组序列预测该家族元
件,分析元件核心基因的进化特性。结果:通过文献搜集和预测,共获得 83 SXT/R391 元件
的基因组序列。在 52 个核心基因中,计算发现 22 个基因在进化过程中经历了重组,基因分布
SXT/R391 元件的 4个必需模块。此外,在 7个基因中检测到了正选择信号。结论:分析了
SXT/R391 元件核心基因的进化机制,为了解该家族的进化和扩散奠定了基础。
Bioinformatics Analysis on the SXT/R391 ICEs Core Genome
ZHANG Qi ZHOU Jing ZHOU Jiang-Lin KONG Na HU Ming-Da PENG Xiao-Chuan LI Bei-Ping
LIANG Long JIN Yuan REN Hong-Guang YUE Jun-Jie
Beijing Institute of Biotechnology
AbstractObjective: To conduct adaptive evolution analysis of core genome of SXT/R391, which is
one of the largest, diverse and well-studied family of integrating conjugative elementsICEs
among Gram-negative bacteria.Methods: We used all available SXT/R391 ICEs genomes to expound
the genetic diversity at the genome level and then explore the evolutionary mechanisms contribute to
its genetic diversity. Results: 83 complete genome sequences of SXT/R391 ICEs from different
bacterial species and origins were collected. Among the 52 identified core genes, we found that 22
genes had recombination signals and 7 genes had significant evidence of positive selection. The results
demonstrated that recombination contributed most to the diversity of SXT/R391 ICEs. Conclusion:
We provide an overview of evolution in SXT/R391 ICEs, which will be helpful for understanding the
evolutionary dynamics of the SXT/R391 family.
原核生物的可移动遗传元件(mobile genetic element,MGEs)可通过接合、转化、转导等方式介
导遗传物质在不同种属细菌间的横向(水平)基因转移(lateral/horizontal gene
transfer,LGT/HGT)。Burrus 2002 年首次对那些可以从染色体上剪切并整合进宿主染色体,
通过接合的方式在细菌细胞之间进行转移的遗传元件进行了归类,称之为整合性接合元件
integrating conjugative elements,ICEs)[1]ICEs 兼有质粒和噬菌体的特征,与接合性质粒相
似,它可通过接合的方式进行转移;与质粒不同的是,它们不能自主复制,其复制方式与温和
噬菌体相似,通过整合进宿主染色体,随宿主染色体一起复制[2]ICEs 具有吸收和传播包括
毒力因子及耐药基因在内的多种特性基因进入细菌宿主细胞的功能。它们常赋予宿主细菌新的
性状,如耐药性和致病性等[3]
迄今,已在多种细菌中发现了 ICEs,但目前还没有公认的 ICEs 分类方法。欧f宇提出了根据
整合酶序列相似性以及核心结构同线性的特征对 ICEs 进行分类的方法[4],按照这种方法可以
把发现的大部分 ICEs 归为 28 个家族。SXT/R391 是目前已知的 ICEs 中研究最早和最详细的一
个家族[5]
SXT 元件最早发现于 1992 年在印度和孟加拉导致霍乱的 O139 群霍乱弧菌 MO10 的染色体上,
该元件能够以整合接合的方式进入宿主菌染色体。SXT 携带多种耐药基因,能够介导霍乱弧菌
对磺胺甲恶唑(sulfamethoxazole,Su)、甲氧苄氨嘧啶(trimethoprim,Tm)、链霉素
streptomycin,Sm)和氯霉素(chloramphenicol,Cm)的耐药性。当时根据其携带的基因编码对
磺胺甲恶唑和甲氧苄胺嘧啶的抗性而命名SXT[6]R391 在上世纪 70 期被鉴定为赋予
那霉素的质粒,最初被认为是不相性群质粒 IncJ”的原生代表20 多年多研究
R391 “和其他被R ”因子 的遗传元件具有与 SXT 度类似的基因组骨架结构以及定的
染色体/重组位点,它们与 SXT 实际上属于同一类的整合接合元件,因此这一类元件
分为同一个 SXT/R391 家族。
目前发现的 SXT/R391 元件基因组的大70120 kbSXT/R391 元件的基因组包括核心保守
和可变区两部分[5,7,8]SXT/R391 元件的保守区编码的基因介导 SXT 元件的整合/、接
合转移和 ICEs 命周期所需的调控外一些保守基因的功能知。SXT/R391 变区基因的
编码物主要负责宿主对抗生素的耐药性、重子抗性、生物膜形成和细菌动能力的
编码毒素-抗毒素系统制性修饰系统、解酶、核内切酶等[9]
为多药耐药(multi-drug resistance,MDR)基因的体,SXT 元件在菌间播散可成新的
型流行。SXT/R391 元件的进化是成其扩散能力增强动力。阐明 SXT/R391 家族元件
的进化特征有防止 SXT 元件扩散,对致病菌防控研究起到重要的实践指意义
    1 材料与方法
1.1 数据搜集
SXT/R391” “ICE”关键词PubMed 中搜获得有报道 SXT/R391 元件的文献,通
阅读文献获SXT/R391 元件的序列信。接进行 SXT/R391 元件的预测,为了保证获得
整的 SXT/R391 元件序列,们从基因组序列整度为整基因组(Complete Genome)和染
色体(Chromosome)状9632 个细菌基因组序列中搜SXT/R391 元件。通过 BLASTp
件进行对,匹配结果中包整合与剪切模块(integration/excision module)、DNA 模块
DNA secretion module)和调控模块(regulation module)等 3个必需模块的蛋白区域推断
在的 ICE,如果在一段连续区域内(70130 kb)出现编码 SXT/R391 家族元件的整合酶
Int Ⅳ泌系统接合蛋白调控蛋白 SetR 的基因,预测该基因组在一个整的 SXT/
R391 元件。最们通过文献和预测获得 83 SXT/R391 家族元件。
1.2 研究方法
SXT/R391 元件的 52 个核心基因序列,对 83 个元件Blast 分析,分析个基因在 83
元件上的分布和复制情况
1.2.1 重组分析
应用分子生物学软件包 RDP4[10]中的 RDPGENECONVBootScanMaxChiChimaera 5
为常的方法,分探测 83 SXT/R391 元件的 52 个核心基因序列的重组件和重组信
号。其中,GENECONV g-scale 设置1允许重组片段内部的错配;其方法的
设置,不作修改P≤0.01 为具有学显着差异
1.2.2 正选择分析
选择在线Datamonkey(http://datamonkey.org/[11]进行 SXT/R391 元件核心基因的正选择
力分析。首先使MUSCLE 进行序列对,提序列及选择算模们选择了 4种模
随机应似法(REL)、应似法(FEL)、祖先计数法(SLAC)及
应进化模方法(MEME)。ω[ω=dN/dS义置换率/义置换率]判断选择的
方向。当 ω>1 且差异显着判断为正向选择,0<ω<1 时为化选择,ω=1 时为中性选择。
    2 结果
2.1 SXT/R391 元件的序列整及菌属分布
通过文献收集和预测共获得 83 SXT/R391 元件的基因组序列,包括从文献中提54 个和
细菌基因组序列中预测的 29 个,元件在宿主基因组的分时间为 19672014 年,地理分布
包括 21 家和地区,元件宿主跨越 25 个菌属。在预测的 29 SXT/R391ICE 元件中,有 12
报道,但和报道元件的整序列。SXT/R391 元件的宿主广泛1),但分布
性,在霍乱弧菌中发现的数最多,奇异变形杆随其。有的是,临床发现
SXT/R391 元件也都集中在霍乱弧菌和奇异变形杆菌。在环境中发现的 SXT/R391 元件大多
自水环境SXT/R391 的菌种分布不均匀说明元件能在宿主中在和保藏可能需要满足
定的遗传背景
2.2 核心基因分析
摘要:

生物信息学下SXT/R391元件核心基因的进化特性探析 摘要:目的:SXT/R391元件是革兰阴性菌中研究最充分、已知成员最多的整合性接合元件家族,本研究的主要目的是探讨SXT/R391元件核心基因组的适应性进化规律。方法:收集数据库中及文献报道的SXT/R391家族元件数据,并利用已测序的细菌基因组序列预测该家族元件,分析元件核心基因的进化特性。结果:通过文献搜集和预测,共获得83个SXT/R391元件的基因组序列。在52个核心基因中,计算发现22个基因在进化过程中经历了重组,基因分布于SXT/R391元件的4个必需模块。此外,在7个基因中检测到了正选择信号。结论:分析了SXT/R391元件...

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