基于核酸适配体的SPE技术研究新成果

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基于核酸适配体的 SPE 技术研究新成果
摘要:核酸适配体是一种经由体外指数级富集系统进化技术筛选得到的随机寡核苷酸片段,该
寡核苷酸片段能特异性结合靶物质。核酸适配体与固相萃取技术相结合,可以高选择性地应用
于复杂样品中痕量组分的萃取、分离、富集和纯化,由此引起了广泛关注。该文综述了基于核
酸适配体的固相萃取研究进展,着重评述了核酸适配体固相萃取柱的制备、固相萃取过程、面
临的问题和应用前景。
Abstract:Aptamers are short single-stranded oligonucleotides within randomly synthesizednucleic acid
libraries by a systematic evolution of ligands by exponential enrichment. Because ofspecific
identification for target molecule,solid phase extraction technique based on aptamersexhibits great
potential for extraction,separation,purification and enrichment of trace-targetanalytes from complex
samples,and it attracts more and more attention. This article brings acomprehensive survey of recent
developments of solid phase extraction techniques based onaptamers,including the preparation of
aptamer-based sorbents,the solid phase extraction pro-cedure and the applications of aptamer-based
solid phase extraction. Limits and prospects foraptamer-based solid phase extraction are also
discussed.
Key words:solid phase extraction SPE);sample pretreatment;affinity
adsorption;aptamer;complex sample;review.
固相萃取(solid phase extraction,SPE[1]因其易于实现自动化和灵活性高的特点,被广泛应用
于分离和富集过程,已被认为是分析测试前对样品进行前处理的标准方法之一。SPE 利用固体
吸附剂吸附液体样品中的目标分析物,使其与样品基质和干扰物分离,再用洗脱液洗脱或加热
解吸附,达到分离和富集目标分析物的目的。使用 SPE 吸附富集可大大增强分析物的检出能
力,提高待测组分的回收率。SPE 方法中固体吸附剂的选择是决定萃取效率、富集倍数和吸附
材料使用寿命的重要因素。然而传统的 SPE 吸附材料(如 C8C18 等)具有萃取选择性低的
缺点,难以高效地用于复杂样品中痕量目标分析物的萃取和富集。
为提高 SPE 材料的选择性,一系列基于 分子识别 的功能化吸附剂被研发出来,主要包括基于
抗 体[2] 分子印迹技术[3] 以及核酸适配体aptamer[4]的吸附材料。其中,基于抗体
的吸附材料特异性强,但抗体的获得费时且昂贵[2].分子印迹聚合物制备方便,然而模板的洗
脱费时且难以达到洗脱完全的效果[3].
近年来,已有不少研究以核酸适配体作为亲和配基应用于 SPE,并获得了很好的效果。核酸适配
体是一种经由体外指数级富集系统进化(systema-tic evolution of ligands by exponential enrich-
ment,SELEX[5] 技术筛选得到的随机寡核苷酸片段,可以是 DNA RNA,能特异性结合靶物
质。核酸适配体可通过分子内的相互作用,如氢键、碱基互补配对等,形成多种三维空间结
构,包括发夹、凸环、假结和 G 四联体结构等。依据这种三维空间结构,核酸适配体可以广泛
地与目标结合,从金属离子[6]到小分子[7]、大分子蛋白质[8],乃至整个细胞[9].核酸适配体又被
“ ”称为 化学抗体 ,但与抗体不的是,核酸适配体可以大量体外合成,这使核酸适配体在生
化学分析领域广泛的应用空间。
由于基于核酸适配体功能化材料的 SPE 方法具有高选择性和高特异性的特点,近年来到广泛
关注。文着重综述基于核酸适配体的 SPE 技术研究进展,对基于核酸适配体的 SPE 材料的
制备、SPE 过程、应用、面临的问题和前景进行综述。
1 基于核酸适配体的固相萃取吸附剂。
基于核酸适配体的 SPE 技术的核是制备基于核酸适配体的吸附材料,这其中及固相体的
选择和活化、适配体的修饰及其在载面的固定。
1.1 体的选择。
选择合适的体材料用于核酸适配体的固定对于基于核酸适配体的吸附剂的制备是很重要的环
。此体材料要具备以属性:(1)化学/ 性,以便SPE 过程中不与分析物或基
摘要:

基于核酸适配体的SPE技术研究新成果摘要:核酸适配体是一种经由体外指数级富集系统进化技术筛选得到的随机寡核苷酸片段,该寡核苷酸片段能特异性结合靶物质。核酸适配体与固相萃取技术相结合,可以高选择性地应用于复杂样品中痕量组分的萃取、分离、富集和纯化,由此引起了广泛关注。该文综述了基于核酸适配体的固相萃取研究进展,着重评述了核酸适配体固相萃取柱的制备、固相萃取过程、面临的问题和应用前景。Abstract:Aptamersareshortsingle-strandedoligonucleotideswithinrandomlysynthesizednucleicacidlibrariesbyasyst...

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