脾虚气弱肠易激综合征便秘的大鼠模型构建研究
脾虚气弱肠易激综合征便秘的大鼠模型构建研
究
肠易激综合征(irritable bowel syndrome，IBS)是常见的功能性肠病，临床上以腹痛或腹胀，常
伴有排便习惯改变和(或) 粪便性状改变为特征，多缺乏公认的形态学、生化指标或基因异常的
改变，常分为腹泻型肠易激综合征、便秘型肠易激综合征和交替型肠易激综合征［1-3］。IBS-
C “ ” “ ” “ ”属于中医 便秘 、 气秘 、 脾虚 等范畴，病机关键在于脾虚气滞，但与肝的关系密切。肝
郁是本病的一个诱因，脾虚气弱是本病的一个基本病理过程，肝郁脾虚气滞是 IBS-C 发病的一
个重要病理机制。肝与情绪恼怒变化关系最为密切，因肝为将军之官，不受遏郁，主疏泄气
机，易为情志所伤，而肝木有病则气机拂郁，脾运化受制。因此，IBS-C 是因肝郁日久伤脾，
加之素体脾气虚弱，中气不足，推动无力，气虚而滞导致大肠传导功能失常［4-6］。
前期研究已完成了 IBS-D 动物模型的建立及评价，发现早期母婴分离能造成脑-肠轴功能的紊
乱［7，8］，为本研究提供了借鉴。目前，便秘动物模型的建立多采用冰水灌胃法、黄连素或
复方地芬诺酯诱导法、禁水不禁食法等［9，10］，前期研究表明，这些方法所建立的模型具
有便秘的特征，其重复性和稳定性均较好，但无法复制 IBS-C 反复发作的临床特征，且停止刺
激后动物可自愈，不适合应用于药效验证。本研究拟采用早期母婴分离诱导脑-肠轴功能紊
乱，分别结合冰水灌胃法、限水法制作 IBS-C 大鼠模型，并建立其评价体系，筛选出最佳的
IBS-C 模型。
1 材料与方法
1. 1 实验动物
剔除雌性的初生 SD 乳鼠 20 窝(133 只) ，SPF 级，购自广州中医药大学实验动物中心
【SCXK(粤)2013-0020 】，与母鼠同笼，第 21 天后断奶并与母鼠分笼，实验操作在广州中医药
大学第一附属医院 SPF 级实验设施中进行【SYXK(粤) 2013-0092】，常规摄食饮水，光照为保
持昼夜节律各 12h 。温度控制在 18 ～24℃ ，相对湿度控制在 50% ～70% ，实验时室温维持在
24 ～26℃。
1. 2 主要仪器与试剂
电子分析天平(日本岛津) ; 烘箱(苏州台华烘箱设备有限公司) ; 大鼠粪尿分离代谢笼(北京佳源兴
业科技有限公司) ; Olympus-BX60 光学显微镜，O-lympus-DP10 数码相机，均购于日本奥林巴
斯公司;直肠扩张实验仪为本实验室自制。
1. 3 动物分组
取SD 大鼠 20 窝，按窝随机分为 6 组。A 组3 窝18 只，B 组3 窝23 只，C 组3 窝19 只，D
组4 窝26 只，E 组3 窝19 只，F 组4 窝28 只。其中 A 组作为正常组，B 组为母婴分离组，C
组为冰水灌胃组，D组为母婴分离结合冰水灌胃组，E 组为限水组，F 组为母婴分离结合限水
组。
1. 4 造模方法
各组大鼠均从出生后适应性饲养 1 周，第 21 天断奶，雌雄分笼。分别按照以下方法造模:母婴
分离法［11］: 每天将乳鼠与母鼠分离，单笼饲养 180 min 后再与母鼠同笼饲养，共14 天。冰
水灌胃法［9］: 给予大鼠 0 ～4℃生理盐水2 mL 灌胃，每日1 次，共14 d。限水法: 采用普通
饮水瓶手持辅助饮水，每天分两次给水，第一次给 1/3 ，第二次给 2/3 ，间隔 12 h。
于开始限水第 1、2 天分别给予未限水前 5d 平均水量的1/6 ，第 3 ～6 天给1/5 ，第 7 ～10 天
给1/4，第 10 ～14 天给1 /3，取整数值。
A 组正常饲养，不做任何处理; B 组从第8 ～21 天进行母婴分离操作，之后正常饲养; C 组第8
～21 天正常饲养，第 22 ～35 天冰水灌胃; D 组第8 ～21 天进行母婴分离，第 22 ～35 天冰水
灌胃; E 组第8 ～21 天正常饲养，第 22 ～35 天限水; F 组第8 ～21 天进行母婴分离，第 22 ～
35 天限水。
2 结果
2. 1 模型的评价
2. 1. 1 大鼠一般行为及生理指标评价
造模结束后( 第36 天) 观察并记录各组大鼠的毛色、大便、进食和饮水、精神状态等。结果A
组活动快速，毛发浓密有光泽，进食和饮水正常，大便未见异常; B 组大鼠活动正常，毛发有
光泽，进食和饮水正常，形体略有消瘦，可见便溏或便秘; C、D、E、F组大鼠出现毛色无光
泽且竖起、拱背、活动减少、易躁易怒、进食量减少、形体消瘦、大便数量减少且颗粒变小质
地坚硬。分别随机抽取各组大鼠 10 只，测定各组大鼠体重及 24h 进食量，结果见表 1。
体重测定结果发现，母婴分离组和正常组大鼠体重差异无显着性(P ＞0. 05) ，而以冰水灌胃
法、限水法及母婴分离结合冰水灌胃法、限水法的大鼠的体重较母婴分离组和正常组比较均显
着降低(P ＜0. 05) ; 与母婴分离组和冰水灌胃组比较，母婴分离结合冰水灌胃法体重显着下降
(P ＜0. 05，P ＜0. 05) ; 与母婴分离组比较，限水组和母婴分离结合限水组的体重均显着下降(P
＜0. 05) ，但限水组和母婴分离结合限水组的体重差异无显着性。
进食量的研究结果表明，与正常组大鼠比较，其他各组大鼠的 24 h 进食量均显着降低(P ＜0.
05) ; 与母婴分离组比较，冰水灌胃组、母婴分离结合冰水灌胃组和母婴分离结合限水组24h 进
食量显着降低(P ＜0. 05) ; 母婴分离结合冰水灌胃组的24 h 进食量显着低于冰水灌胃组(P ＜0.
05) ，但母婴分离结合限水组24 h 进食量显着高于母婴分离结合冰水灌胃组(dP ＜0. 05) ，与
限水组的24 h 进食量差异无显着性(P ＜0. 05) 。
2. 1. 2 粪便相关评价
每组取 3 只大鼠解剖，观察各肠道粪便分布及形态。结果发现，A 组和B 组大鼠回肠和结肠中
可见呈软柱状大便，空肠中无明显粪便残留; C、D、E、F组大鼠粪便集中于结肠部，多呈连
珠状或球状，色泽较深，空肠和回肠无明显粪便残留。
依据前期研究［8］，分别于造模结束后( 第36 天) 随机抽取每组大鼠 10 只单独置于代谢笼
中，禁水禁食，收集 4 h 内大鼠的粪便，记录 4 h 内排便颗粒数，根据 Bristol 大便性状图谱
［2 ］记录大便形态，并按照中国药典附录烘干法测定粪便含水量。结果见表 1。
由表1 可知，与 A 组比较，C、D、E、F 组大鼠的排便颗粒数显着减少(P ＜0. 05) ，Bristol 积
分和粪便含水量均显着降低(P ＜0. 05) ; B 组大鼠的排便颗粒数、Bristol 积分和粪便含水量无
明显变化，但波动较大，Bristol 积分体现出腹泻或便秘两种状态; 与B 组比较，C、D、E、F
组的排便颗粒数、Bristol 分型积分值和粪便含水量均显着降低(P ＜0. 05) ; C、D、E、F 组之间
的粪便指标差异无显着性。结果提示，冰水灌胃法、限水法和母婴分离结合冰水灌胃、限水建
立的模型均表现出排便颗粒数减少、粪便含水量下降及粪便分型积分降低等症状，符合便秘的
临床特征。
2. 1. 3 肠道敏感性评价
于造模结束后第 36 天随机抽。取各组大鼠 10 只，参考前期研究［8］，测定各组大鼠腹部回
缩反射评分为 3 分时的压力阈值，每只大鼠测定3 次，间隔 5 min 。结果见表 1 。由表1 可知，
与A 组比较，B、C、D、F 组的肠道压力阈值显着降低(P ＜0. 05) ，E组的压力阈值无显着改
变(P ＞0. 05) ; 与母婴分离组比较，母婴分离结合冰水灌胃组的肠道压力阈值显着降低(P ＜0.
05) 。结果提示母婴分离法、冰水灌胃法、母婴分离结合冰水灌胃和母婴分离结合限水法均能
导致肠道敏感性升高，限水法对肠道敏感性无明显影响，其中母婴分离结合冰水灌胃法的肠道
超敏感性最为显着。
摘要：
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脾虚气弱肠易激综合征便秘的大鼠模型构建研究肠易激综合征(irritablebowelsyndrome，IBS)是常见的功能性肠病，临床上以腹痛或腹胀，常伴有排便习惯改变和(或)粪便性状改变为特征，多缺乏公认的形态学、生化指标或基因异常的改变，常分为腹泻型肠易激综合征、便秘型肠易激综合征和交替型肠易激综合征［1-3］。IBS-C“”“”“”属于中医便秘、气秘、脾虚等范畴，病机关键在于脾虚气滞，但与肝的关系密切。肝郁是本病的一个诱因，脾虚气弱是本病的一个基本病理过程，肝郁脾虚气滞是IBS-C发病的一个重要病理机制。肝与情绪恼怒变化关系最为密切，因肝为将军之官，不受遏郁，主疏泄气机，易为情志所伤，而...
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作者：闻远设计
分类：社科文学类资料
价格：免费
属性：4 页
大小：87.71KB
格式：DOCX
时间：2023-07-18
