探究ape-lin是否促进骨髓间充质干细胞的增殖

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探究 ape-lin 是否促进骨髓间充质干细胞的增殖

来源：学术堂作者：周老师

发布于：2015-08-06 共3211 字

1993 年O'Down 等[1] 首次发现 7 次α 螺旋的跨膜区段组成的 G 蛋白偶联受体 APJ （apelin-

angioten-sin receptor-like,APJ ）.1998 年，Tatemoto 等[2] 从牛的胃蛋白提取并纯化 APJ 的内源

性配体 apelin.Apelin / APJ 系统组织分布广泛，生物学功能多样。

研究发现，Apelin 具有舒张血管、降低血压、增强心肌收缩力、调节下丘脑-垂体激素释放、

抑制抗利尿激素的释放、调节摄食摄水以及抵抗艾滋病毒侵入细胞等多种生物学效

应。Apelin/APJ 系统还参与糖尿病肾病、大血管并发症、视网膜新生血管的发展，是一种重要

的生理调节肽。Apelin / APJ 系统具有促进细胞增殖的作用。

Apelin 在人的成骨细胞大量表达，可刺激成骨细胞的增殖。在鼠的胃上皮细胞含有大量 Apelin,

并证明在体外 Apelin 刺激胃上皮细胞的增殖。Apelin 具有血管生成因子的作用，研究发现在视

网膜血管内皮细胞中，Apelin-13 和Apelin-36 呈浓度依赖性促进细胞迁移、增殖和毛细血管形

成。骨髓间充质干细胞（ bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）主要来源于骨髓组织，

具有多向分化潜能，增殖迅速、可塑性、可移植性及自我更新能力强。在体外可被诱导分化为

成骨细胞、脂肪细胞、血管内皮细胞、神经元样细胞等，这正是其多向分化潜能特点的体现。

文献[3] 报道 apelin 能够参与多种细胞增殖的过程，但 apelin 是否能影响骨髓间充质干细胞的增

殖尚不清楚，也未见相关报道。本文旨在探究 ape-lin 是否促进骨髓间充质干细胞的增殖。

1 材料与方法

1. 1 试剂与材料 Sprague-Dawley （SD ）大鼠购自湖南农业大学动物部； Apelin-13 多肽（

057-19 ）购自美国 Phoenix Biotech 公司；培养基、血清、胰酶等均购自美国 Gibco 公司；

MTT 购自美国 Sigma 公司；GNP-9080 隔水式恒温培养箱（上海精宏实验设备有限公司） ; 流

式细胞仪（美国 Becton Dickinson 公司） ; 酶标仪（美国 Labsystem Dragon 公司） .

1. 2 大鼠骨髓间充质干细胞的分离与培养将SD 大鼠浸泡于75% 医用酒精中 15 min,在无菌条

件下切开大鼠组织，取股骨，去除表面软组织，冲出骨髓，接种于培养瓶。用含 10%FBS 的

DMEM 高糖培养基，37 ℃ 5% CO2 培育箱中孵育培养。当培养的原代细胞生长密度达到70%

~ 80% 以上后，弃去原培养液，用 PBS 洗2 次，加入0. 05% 胰蛋白酶消化液，放置于CO2 培

养箱中孵育 5 min; 用巴式吸管吸取培养基反复吹打培养瓶壁，当贴壁的细胞悬浮后，取悬浮液

800 r/min 离心8 min; 弃去上清液，加入培养基，继续培养至细胞重新悬浮时，分瓶进行传代培

养。倒置显微镜观察细胞生长状态。

1. 3 流式细胞术检测细胞周期将细胞以 1 ×106cells / L 接种于六孔板，直到细胞生长至 70%

~80%状态时，用含有 0.1%胎牛血清胞培养 24 h （细胞同步化） , 然后分别加入不同浓度

apelin-13 继续孵育 24 h 后用胰酶消化并收集细胞，PBS 洗两遍，弃上清，加入1 mL 70% 预冷

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摘要：

探究ape-lin是否促进骨髓间充质干细胞的增殖来源：学术堂作者：周老师发布于：2015-08-06共3211字1993年O'Down等[1]首次发现7次α螺旋的跨膜区段组成的G蛋白偶联受体APJ（apelin-angioten-sinreceptor-like,APJ）.1998年，Tatemoto等[2]从牛的胃蛋白提取并纯化APJ的内源性配体apelin.Apelin/APJ系统组织分布广泛，生物学功能多样。研究发现，Apelin具有舒张血管、降低血压、增强心肌收缩力、调节下丘脑-垂体激素释放、抑制抗利尿激素的释放、调节摄食摄水以及抵抗艾滋病毒侵入细胞等多种生物学效应。Apelin/AP...

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