测定白血病细胞Jurkat细胞内谷胱甘肽的含量变化

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测定白血病细胞 Jurkat 细胞内谷胱甘肽的含量

变化

肿瘤已经成为危害人类生命的一种常见疾病, 随着磁疗在临床应用的广泛开展,有关磁场对生物

机体抗肿瘤细胞的研究也日益增多.但磁场对生物的影响比较复杂,在不同的磁场强度、温度、

照射时间等条件下,生物效应会有所不同.通常较强的磁场会抑制生物的生长,而弱磁场对生物可

能具有促进作用,不同种类生物其磁效应结果也会不同. 为进一步探索磁场的生物学效应, 我们在

4T 恒定强静磁场作用 1、8h 和24h 后,采用生物化学 DTNB 法测定白血病细胞 Jurkat 细胞内谷

胱甘肽的含量变化,旨在探讨强静磁场对肿瘤细胞的生物效应,为磁疗在临床医学的应用提供一

定实验依据.

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

1.1.1 材料 ①细胞系 : 人急性淋巴细胞性白血病细胞株 Jurkat,购于中国科学院上海细胞库. ②试

剂和药物: 改良型 RPMI-1640 培养基( 美国 HyClone 公司);胎牛血清( 美国 HyClone 公司;谷胱甘

肽(GSH)测定试剂盒(南京建成生物工程研究所). ③主要仪器:UV-1800 紫外可见分光光度计(中

国上海美谱达仪器有限公司 );MCO175CO2 培养箱(日本三洋电器).

1.1.2 强磁场设备沈阳工业大学工程电磁场理论与新技术研究所自行开发, 国家发明专利号

ZL200710011163,在工作空间中产生竖直方向的稳定超强磁场, 磁场中心磁感应强度为 4T,强磁

体的工作空间是一个竖立圆柱形通孔, 内径 8 mm, 长度 150 mm.在工作空间轴心方向上,磁场中心

磁感应强度比较均匀. 工作空间的温度为(37±1)℃.

1.2 实验方法

1.2.1 细胞培养急性淋巴细胞性白血病细胞株 Jurkat, 培养于含 10% 胎牛血清的 RPMI1640 培养

液中, 置于 37℃,5%CO2 饱和湿度培养箱中培养,3~4 d 换液一次.

1.2.2 细胞内 GSH 含量测定取对数生长期的白血病细胞株 Ju-rkat 细胞, 调整细胞数为每毫升

1×106. 实验分组:实验组(磁场照射)、对照组(无磁场照射). 在37℃条件下,将实验组细胞置于恒

强磁场进行照射,对照组细胞不做磁场照射.磁场照射结束后,收集细胞, 以PBS 液洗涤 3 次, 用

40Hz 超声波粉碎细胞, 以4000rpm/min, 离心 10min 后留取上清,实验按试剂盒说明书操作,显色反

应后测定吸光度, 使用UV-1800 紫外可见分光光度计,测定波长为 420 nm,1 cm 光镜,双蒸水调零

,比色测定待测试样的光密度值(OD), 并记录空白管、标准管、实验组和对照组所对应的 OD 值

. 实验重复3 次. 按以下公式计算细胞内 GSH 含量:GSH 含量(gGSH/L)=×标准品浓度×GSH 分子

量× 样品稀释倍数,其中标准管浓度(20umol/L). 将测定的 OD 值按计算式转换为细胞内含量,单位

为mg/L.

1.3 统计学处理

统计学分析采用 SPSS 11.0 统计软件,结果以均数标准差(x±s)表示, 两样本均数比较采用 t 检

验,P<0.05 为差异有统计学意义.

2 结果

强静磁场连续照射 1、8h 和24h 后, 各实验组细胞内谷胱甘肽的含量低于对照组,差异有统计学

意义(P<0.05), 如表 1 所示.不同照射时间组谷胱甘肽含量比较,随照射时间延长,谷胱甘肽含量逐

渐降低,但差异无统计学意义.

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摘要：

测定白血病细胞Jurkat细胞内谷胱甘肽的含量变化肿瘤已经成为危害人类生命的一种常见疾病,随着磁疗在临床应用的广泛开展,有关磁场对生物机体抗肿瘤细胞的研究也日益增多.但磁场对生物的影响比较复杂,在不同的磁场强度、温度、照射时间等条件下,生物效应会有所不同.通常较强的磁场会抑制生物的生长,而弱磁场对生物可能具有促进作用,不同种类生物其磁效应结果也会不同.为进一步探索磁场的生物学效应,我们在4T恒定强静磁场作用1、8h和24h后,采用生物化学DTNB法测定白血病细胞Jurkat细胞内谷胱甘肽的含量变化,旨在探讨强静磁场对肿瘤细胞的生物效应,为磁疗在临床医学的应用提供一定实验依据.1材料与方法1.1...

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