核酸酶P1摇瓶发酵工艺初步研究
核酸酶 P1 摇瓶发酵工艺初步研究
摘要
主要探索了本实验室提供的产核酸酶 P1 桔青霉的种子液生长曲线，研究在何种发酵工艺
下酶活能够达到更高。根据不同的单因素探索与对比，最终培养基组成成分（质量体积分数）
为: 蔗糖 1.5% , 蛋白胨 0.6 % , 胰蛋白胨 0.05%, 磷酸氢二钾 0.05%, 磷酸二氢钾 0.05%，0.08% 氯
化钙，0.01%硫酸锌,0.01% 硫酸镁，初始 p H6.4, 菌种接种量 15%，28℃ ，培养 72h 达酶活最高
值, 最高酶液酶活为 788 U/ml。在新发酵方案下酶活比初始的核酸酶 P1 酶活有了 23.1%的增
长，有望成为更适宜的发酵条件。
Abstract
The growth curve of the nuclease P1, Penicillium citrinum, which was supplied by ourlaboratory,
was mainly explored. According to different single factor exploration and comparison,the final
components (mass fraction) are: Sucrose 1.5%, peptone 0.6%, tryptone 0.05%,hydrogen phosphate
two potassium 0.05%, potassium dihydrogen phosphate 0.05%, 0.08%calcium chloride, 0.01% zinc
sulfate, 0.01% Magnesium Sulfate，initial p H6.4, inoculation ofbacteria 15%, 28, and culture. 72h
was the highest enzyme activity, and the highest enzymeactivity was 788U/ml. Under the new
fermentation schedule, the enzyme activity increased by23.1% compared with the initial nuclease P1
enzyme activity,It is expected to be a newFermentation conditions.
Keywords: Penicillium citrinum; nuclease P1; fermentation ;shake flask ;enzymeactivity。
1．引言
1.1、桔青霉。
核酸酶 P1 的生产工艺到现在可以总结为两种：桔青霉发酵产核酸酶 P1 和直接从麦芽根中
提取目标产物，试验采纳了产核酸酶 P1 的霉菌来发酵,这种霉菌就是桔青霉。桔青霉的种属是
半知菌类，串珠霉目的一属，表观与曲霉临近，多核多细胞是其菌丝的根本组成单元。青霉菌
在平板上看下来，平板正面深绿色，背面灰白色菌，菌落的中央有白色成长为深灰绿色。菌丝
体的组成为横隔的菌丝，一般情况下以产生分生孢子的方法来进行无性繁殖，当产生孢子时，
多细胞的分生孢子梗会在菌丝体顶端出现，梗的顶端分枝两三次，成串的分生孢子会分裂在每
枝的末端细胞[16] 。桔青霉在平板上成长模样以下图 1 所示。
常见的生态分布:腐烂的桔子、蔬菜、肉类以及衣服上面。多呈灰绿色。其可以或许导致
常见的青霉病。 现实中桔青霉是生产抗生素中无可或缺的菌种，另外还有生产有机酸，如葡萄
糖酸、柠檬酸的功能[16]。
1.2 、 核酸酶 P1的国内外生产研究现状。
早在 50 年月以前, 从海外科研就能有了从蛇毒或小肠粘膜中提取核酸酶 P1 用于出产核苷
酸的手艺，一些外国的科学家就可以够用微生物发酵的方式出产核酸酶 P1，而且跟着晶体学
和蛋白质提纯手艺的成长在生物学中的普遍被利用, 越来越多的人们逐渐对该酶蛋白的分子结
构和活性中心有了更多的钻研与希望，在此同时人们也进一步扩大了核酸酶 P1 在医药、食
物、和分子生物学等方面的利用远景[6] 。核酸酶 P1 的结构和酶学特性的研究, 对于发展我国核
苷酸工业有着重要的理论和现实意义。
我国的现状是具有很充足的先进的 RNA 生产工艺以及核糖核酸 RNA 的资源，常大量应用
于核苷酸工业生产当中[14]。可是因为当今的生产环境有限，导致桔青霉发酵液中核酸酶 P1 的
活性较低, 国内利用深层发酵法出产获得大量核酸酶 P1 的厂家少之又少，直接影响着核苷酸的
出产。根据现在已有的情况, 我们对桔青霉摇瓶发酵生产核酸酶 P1 的适宜条件进行了不同方向
的因素实验, 目的在于为以后进行的工业化生产核酸酶 P1 的产量提高打下良好的基础。
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核酸酶P1摇瓶发酵工艺初步研究 摘 要 主要探索了本实验室提供的产核酸酶P1 桔青霉的种子液生长曲线，研究在何种发酵工艺下酶活能够达到更高。根据不同的单因素探索与对比，最终培养基组成成分（质量体积分数） 为: 蔗糖1.5% , 蛋白胨0.6 % , 胰蛋白胨0.05%, 磷酸氢二钾0.05%, 磷酸二氢钾0.05%，0.08% 氯化钙，0.01%硫酸锌,0.01% 硫酸镁，初始p H6.4, 菌种接种量15%，28℃ ，培养72h 达酶活最高值, 最高酶液酶活为788 U/ml。在发酵方案下酶活比初始的核酸酶P1 酶活有了23.1%的增长，有望成为更适宜的发酵条件。 Abst...
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作者：闻远设计
分类：社科文学类资料
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